ለዲቢ (2026) ቋሚ የጂን ሕክምና

ይህ ፕሮጀክት የኮላጅን-7 ጂንን የሚጠግን ወይም የሚተካ ለአጠቃቀም ዝግጁ የሆነ ሕክምና እስካሁን ባያመጣም፣ ለወደፊት ሕክምናዎች አስፈላጊ መሠረት ጥሏል። ተመራማሪዎች የጂን አርትዖት ሕክምናን ወደ ሞዴል የቆዳ ህዋሶቻቸው ማስገባት አስቸጋሪ መሆኑን ሲገነዘቡ፣ ከሰውነት ውጭ የቆዳ ሴሎችን አርትዖት መርምረዋል እና ይህ በቀጥታ ወደ ሰው ቆዳ የጂን አርትዖት መሳሪያዎችን ከማቅረብ ጋር ሲነጻጸር ቀላል እና ደህንነቱ የተጠበቀ የRDEB ጂን ሕክምናን ሊያስከትል እንደሚችል ሪፖርት አድርገዋል።

ተመራማሪዎች አር አሳትመዋልግኝቶቻቸውን በጆርናል ሞለኪውላር ቴራፒ ላይ ገምግመዋል 2025 ውስጥ.

የሚሰራ ጂን የማስገባት ሂደት የመጀመሪያው እርምጃ በቤተ ሙከራ ውስጥ 'ለአጠቃቀም ቀላል' ሴሎች ውስጥ ተገኝቷል። ተመራማሪዎች አሁን በታካሚ የቆዳ ሴሎች ውስጥ ይህን ለማድረግ ደህንነቱ የተጠበቀ እና ውጤታማ መንገድ እየሰሩ ነው። ተመራማሪዎች የሚሰራውን ጂን ወደ ህዋሶች በዲሽ ውስጥ ለማስገባት ናኖፓርቲክልሎችን ሲጠቀሙ የቆዩ ሲሆን አሁን በሞዴል ቆዳ ላይ እየሞከሩ ነው።

ውጤቶች በ 2024 ውስጥ ታትመዋል የብሪታንያ ጆርናል ኦቭ የቆዳ በሽታ እና በ ጆርናል ኦቭ መርማሪ የቆዳ በሽታ.

ዶ/ር ጃኮው በ2024 በአባላት የሳምንት መጨረሻ ላይ ስለ ፕሮጀክቱ ማሻሻያ አቅርበዋል፡-

መሪ ተመራማሪ፡-

ዶ/ር ጆአና ጃኮው በ epidermolysis bullosa gene therapy እና በጂን አርትዖት አፕሊኬሽኖች ውስጥ ሰፊ ልምድ እና የተረጋገጠ ታሪክ አላት። ዶ/ር ጃክኦው በDEB ውስጥ CRISPR-Cas9፣ ቤዝ እና ዋና አርትዖትን ጨምሮ የተለያዩ የጂን አርትዖቶችን በመጠቀም በ keratinocytes፣ fibroblasts እና በቀላሉ የማይበገሩ ፕሉሪፖተንት ስቴም ሴሎች (iPSCs) ሚውቴሽን በትክክል ለመጠገን አሳይቷል።

ተባባሪ ተመራማሪዎች፡-

ፕሮፌሰር ጆን ማክግራዝ በ COL7A1-የተስተካከሉ ፋይብሮብላስትስ መርፌዎች ላይ በመመርኮዝ የላቁ የDEB ሕዋስ ሕክምናዎችን አዘጋጅተዋል ፣ ይህም በክሊኒካዊ ሙከራዎች ውስጥ ደህንነትን እና ቀደምት ውጤታማነትን ያሳያል። እሱ በሴል ናሙና ምርጫ እና ባህሪ ላይ ያተኩራል እና ለታካሚዎች አዲስ የ COL7A1 ጂን ሕክምናዎች ፈጣን ክሊኒካዊ ትርጉም ለማግኘት የቧንቧ መስመር ለመፍጠር ይረዳል ።

ፕሮፌሰር እስጢፋኖስ ሃርት (ዩሲኤል፣ GOSH፣ ሎንዶን) በአዳዲስ መላኪያ ቀመሮች እና ቴራፒዩቲክ ኑክሊክ አሲዶች ከቫይረስ ካልሆኑ ናኖፓርቲሎች ጋር እና ለበሽታዎች ሕክምና ሲስቲክ ፋይብሮሲስ ፣ ኒውሮብላስቶማ ፣ የመጀመሪያ ደረጃ ሲሊየም dyskinesia እና ለሰውዬው ሜላኖሲቲክ naevi አተገባበር ሰፊ ልምድ አላቸው። .

“DEB ያለባቸውን ሰዎች ማዳመጥ፣ “የጂን ክሬም” ህልም በሁሉም ሰው ምኞት ዝርዝር ውስጥ ከፍተኛ እንደሆነ እናውቃለን… አዲሱ የምርምር ፕሮጀክታችን ዘላቂ የሆነ የአካባቢ የ COL7A1 የጂን ሕክምናን ስለማዳበር ነው። በዚህ ደረጃ የCOL7A1 ዘረ-መል (ጅን) ሙሉ ቅጂ ደህንነቱ በተጠበቀ ሁኔታ ዲቢ ባለበት ሰው ጂኖም ውስጥ ለማስገባት አዲስ ቴክኖሎጂ ማዳበር እንፈልጋለን።

- ዶክተር ጆአና ጃኮው

የስጦታ ርዕስ፡- PASTE-mediated Superexon የ COL7A1 ምትክ ለdystrophic Epidermolysis Bullosa ሕክምና

ባለፉት 30 ዓመታት ውስጥ DEB የሚከሰተው በዲኤንኤ ልዩነት በ VII collagen gene (COL7A1) አይነት መሆኑን ተምረናል። የሚሰራ COL7A1 ጂን ከሌለ ቆዳ በቂ VII collagen ፕሮቲን መስራት አይችልም ይህም ማለት ቆዳው ለጉዳት የመቋቋም አቅም አነስተኛ እና አረፋዎች ይከሰታሉ. የተመራማሪዎች ፈተና የ COL7A1 ጂን እንዴት መተካት ወይም መጠገን ነው። DEB ያለባቸውን ሰዎች ማዳመጥ፣ “የጂን ክሬም” ህልም በሁሉም ሰው የምኞት ዝርዝር ውስጥ ከፍተኛ እንደሆነ እናውቃለን።

በስታንፎርድ ዩኒቨርሲቲ ባልደረቦች ከክሪስታል ባዮቴክ ጋር በመተባበር አዲስ ወቅታዊ የ COL7A1 ዘረ-መል ምርትን በማዘጋጀት የቅርብ ጊዜ መሻሻል አስደስቶናል፣ ምንም እንኳን ይህ አካሄድ ለረጅም ጊዜ የሚቆይ ውጤት እንዲኖረው ተደጋጋሚ ማመልከቻዎች ሊኖሩት ቢፈልግም። አዲሱ የምርምር ፕሮጀክታችን ዘላቂ የሆነ የCOL7A1 የጂን ህክምናን ስለማዳበር ነው። በዚህ ደረጃ፣ የCOL7A1 ጂን ሙሉ ቅጂ በደህና በDEB ባለ ሰው ጂኖም ውስጥ በቋሚነት ለማስገባት አዲስ ቴክኖሎጂ ማዳበር እንፈልጋለን። አዲሱ የጂን ሕክምና ሥርዓት PASTE ይባላል፣ እሱም “ፕሮግራም ሊደረግ የሚችል መደመር በሳይት-ተኮር ኢላማዎች” ማለት ነው። ለዚህ ፕሮጀክት፣ COL7A1 ጂን ወደ DEB የቆዳ ሴሎች ለማስገባት PASTEን እንጠቀማለን። ከዚያም VII collagenን ወደነበረበት መመለስ መቻልን እናረጋግጣለን. ከዚያም ቴራፒውን ወደ ሴሎች ብቻ ሳይሆን ወደ ቆዳ ውስጥ ማግኘታችንን ለማረጋገጥ የሊፕዲድ አቅርቦት ስርዓቶችን ማመቻቸት ላይ እንሰራለን. ለአሁን፣ ክሊኒካዊ ሙከራ እያደረግን አይደለም፣ ነገር ግን ያ ቀጣዩ እቅዳችን ይሆናል።

ይህ ፕሮጀክት የሚያተኩረው ለዲስትሮፊክ ኤፒደርሞሊሲስ ቡሎሳ (DEB) ሕክምናን ለመፈወስ ሐሳብ በማዘጋጀት ላይ ነው። COL7A1 ለቆሰለ ቆዳ ለማድረስ ያልተዋሃዱ የቫይረስ ቬክተሮችን በመጠቀም ለDEB ወቅታዊ የጂን ህክምናን በማዘጋጀት ትልቅ እድገት ታይቷል ምንም እንኳን ተደጋጋሚ አስተዳደር ለዘለቄታው ጥቅም አስፈላጊ ቢሆንም።

እንደ ተጨማሪ አቀራረብ፣ የሙሉ ርዝመት COL7A1 ጂን ዘላቂ ውህደትን በፕሮግራም ሊተገበር የሚችል በጣቢያ-ተኮር ኢላማ አድራጊ አካላት (PASTE) በመጠቀም ለመጠቀም ዓላማችን ነው። PASTE የፕራይም አርትዖትን ልዩነት እና ደህንነትን ከትልቅ የሴሪን ውህዶች የመሸከም አቅም ጋር በማጣመር እስከ 36 ኪ.ቢ የሚደርስ ቁሳቁስ በጂኖም ውስጥ በተዘጋጁ ልዩ ምህንድስና ጣቢያዎች ላይ ለማስተዋወቅ። የሙሉ-ርዝመት COL7A1 ዘረ-መል (ጅን) ዘላቂ ውህደት “አንድ መጠን ለሁሉም የሚስማማ” የዲኤንኤ አርትዖት አካሄድ እንዲኖር ያስችላል።

በመጀመሪያ፣ ከDEB ታካሚ ቆዳ ውስጥ keratinocytes እና/ወይም fibroblasts እንመርጣለን እና እንገልፃለን። ከዚያ በኋላ የተበጁ ፕላዝማይድ ኤሌክትሮፖሬሽን በመጠቀም PASTE የግንባታ ዲዛይን እናረጋግጣለን። የCOL7A1 ጂን ውህደት PCR- እና Sanger ቅደም ተከተል በመጠቀም ይረጋገጣል። በተሳካ ሁኔታ የተስተካከሉ ሴሎች ይገለላሉ እና የ VII አይነት ኮላጅን ማዳንን ለመመርመር እንደገና ተለይተው ይታወቃሉ። የግንባታ ዲዛይን ከተረጋገጠ በኋላ፣ በፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ ምትክ፣ PASTE ኢንዛይሞች በብልቃጥ በተሰራ ኤሌክትሮፖሬትድ ኤምአርኤን በኩል ይሰጣሉ። በመቀጠል፣ PASTE ማሽነሪዎችን ወደ ዒላማ ህዋሶች ለማድረስ ተቀባይ-ያነጣጠሩ ሊፒድ-ተኮር ናኖፓርተሎች (LNPs) በማዘጋጀት በአቅርቦት ዘዴዎች ላይ እናተኩራለን። የፋጅ ማሳያ ከፋይብሮብላስትስ እና ከ keratinocytes ጋር በጥብቅ የተሳሰሩ የፔፕታይድ ቅደም ተከተሎችን ይለያል። የሊፒድ ክፍሎች በ 3D የቆዳ ሞዴሎች ውስጥ ለአካባቢያዊ አተገባበር ተስማሚነታቸው ይመረመራሉ. በድምሩ፣ ይህ ፕሮጀክት ለDEB አዲስ የጂን ምትክ ሕክምናን ለማዘጋጀት ያለመ ነው።

የእኛ ፕሮጀክት ሁለት ዋና ዓላማዎች አሉት.

በመጀመሪያ፣ የማይለወጥ ጂን ሙሉ ቅጂ ወስደን በታካሚዎች ዲ ኤን ኤ ውስጥ ማስገባት እንፈልጋለን ስለዚህም ሴሎቻቸው ለጤናማ ቆዳ የሚያስፈልገውን ፕሮቲን መስራት እንዲጀምሩ ነው። ይህ ጂኖታይፕ-አግኖስቲክ (ማለትም የትኛውም ሚውቴሽን ቢኖረውም ይሰራል) እና ቋሚ ፈውስ ለመፍጠር ያስችለናል። ባለፉት ስድስት ወራት ውስጥ፣ በቀላሉ ሊለወጡ በሚችሉ ህዋሶች ውስጥ የዲኤንኤ አርትዖት የመጀመሪያ እርምጃ አግኝተናል፣ ነገር ግን ታካሚ የቆዳ ሴሎች የበለጠ ግትር ሆነው እየታዩ ነው። አሁን አስፈላጊ በሆኑ ሴሎች ውስጥ ዲ ኤን ኤ ለመለወጥ ደህንነቱ የተጠበቀ እና ውጤታማ ፕሮቶኮል እንዲኖረን እየሰራን ነው።

በሁለተኛ ደረጃ፣ ይህን የዲኤንኤ ማሻሻያ ማሽነሪ ወደ ቆዳ ህዋሶች የሚሸከሙ ናኖፓርተሎች መፍጠር እንፈልጋለን በቀላሉ ሊተገበር በሚችል የአካባቢ ክሬም አሰራር። ለእነዚህ nanoparticles በተለያዩ ቀመሮች እየሞከርን ነው። በዲሽ ውስጥ ናኖፓርትቲሎችን ወደ ሴሎች በመቀባት አንዳንድ ተስፋ ሰጪ ውጤቶችን አግኝተናል፣ እና አሁን በሞዴል ቆዳ ላይ እየሞከርናቸው ነው። ይህ የበለጠ አስቸጋሪ ይሆናል (ቆዳው ነገሮችን ከውጪ ለማስቀረት በተለይ ተሻሽሏል) ነገር ግን በ EB ሕመምተኞች ላይ የቆዳ መከላከያው ቀድሞውኑ ተዳክሟል እና ተረብሸዋል. የኢቢ ታካሚዎችን ቆዳ ለመድገም የሞዴሉን ቆዳ ቅድመ-ህክምና የምናደርግባቸውን መንገዶች እየፈለግን ነው፣ እና ያ ናኖፓርቲሎች ወደ ቲሹ ውስጥ ጠልቀው እንዲገቡ ያደርጋል ብለን ተስፋ እናደርጋለን። (ከ2025 የሂደት ሪፖርት።)

ፕሮጀክታችን በCOL7A1 ጂን ውስጥ ባሉ ጉድለቶች ምክንያት የሚመጣ ከባድ የጄኔቲክ የቆዳ ችግር ላለባቸው ሰዎች አዲስ ዓይነት የጂን-ተኮር ሕክምና ለማዘጋጀት ያለመ ነው። ይህ ጂን የቆዳ ንብርብሮችን አንድ ላይ ለማቆየት የሚረዳ ኮላጅን VII የተባለውን ፕሮቲን ለማምረት ኃላፊነት አለበት። ያለሱ ቆዳው በቀላሉ የሚሰበር እና ለአረፋ እና ለቁስል የተጋለጠ ይሆናል። ፕራይም ኤዲቲንግ የሚባል የላቀ የጂን አርትዖት አቀራረብን ዳስሰናል፣ ይህም PASSIGE በመባል ከሚታወቀው ስትራቴጂ ጋር ተዳምሮ ትላልቅ ጤናማ ዲኤንኤዎችን ወደ ሴሎች ለማስገባት የተነደፈ ነው።

ግቡ በታካሚ ሴሎች ውስጥ ያለውን ጉድለት ያለበትን ጂን እንደገና ተግባራዊ ኮላጅን VII ማምረት እንዲችሉ መተካት ወይም መጠገን ነው። በመጀመሪያዎቹ ሙከራዎቻችን፣ ይህ ስርዓት በመደበኛ የላቦራቶሪ ሴሎች ውስጥ እንደሚሰራ በተሳካ ሁኔታ አሳይተናል። ሆኖም፣ ወደ ይበልጥ ክሊኒካዊ ጠቀሜታ ያላቸው የቆዳ ሴሎች (ኬራቲኖሳይቶች እና ፋይብሮብላስት) ስንሸጋገር፣ ተግዳሮቶች አጋጥመውናል። በተለይም፣ የጂን አርትዖት መሳሪያዎችን ወደ እነዚህ ሴሎች በብቃት ማድረስ እና ለሙሉ ጂን እርማት የሚያስፈልጉትን ትላልቅ የዲኤንኤ ማስገቢያዎች ማሳካት አስቸጋሪ ነበር። እነዚህ ተግዳሮቶች ቢኖሩም፣ አስፈላጊ እድገት አሳይተናል። ኤሌክትሮፖሬሽን በሚባል ዘዴ በመጠቀም በታካሚዎች በሚመነጩ ሴሎች ውስጥ የበለጠ ውጤታማ በሆነ መንገድ እንዲሰራ የጂን አርትዖት አቀራረባችንን አሻሽለነዋል። ይህም በCOL7A1 ጂን ውስጥ በርካታ በሽታ አምጪ ሚውቴሽኖችን በተሳካ ሁኔታ እንድናስተካክል አስችሎናል። ግኝቶቻችን የጂን አርትዖት ውጤታማነት የሚወሰነው በታለመው የተወሰነ የዲኤንኤ ክልል ላይ እንደሆነ ይጠቁማሉ፣ ይህም የወደፊት ስራን ይመራል።

በጣም አስፈላጊው ነገር፣ አሁን አማራጭ የሕክምና ስልቶችን እየመረመርን ነው። አንድ ተስፋ ሰጪ አካሄድ ከሰውነት ውጭ ያሉትን የታካሚ ሴሎችን ማስተካከል (ex vivo)፣ በተሳካ ሁኔታ የተስተካከሉ ሴሎችን መምረጥ እና ከዚያም ወደ ቆዳ መልሰው መቀባትን ያካትታል። የቅርብ ጊዜ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የተስተካከሉ ሴሎች ተፈጥሯዊ ጥቅም ሊኖራቸው እና አንዴ ከተተገበሩ በኋላ ሊስፋፉ ይችላሉ፣ ይህም የሕክምና ውጤቶችን ሊያሻሽል ይችላል። ይህ የጂን አርትዖት መሳሪያዎችን በቀጥታ ወደ ሰውነት ከማድረስ ጋር ሲነጻጸር ቀላል እና ደህንነቱ የተጠበቀ ሕክምናን ሊያመጣ ይችላል።

በተለይም ዋና ዋና የቆዳ ሴል ዓይነቶች ማለትም ፋይብሮብላስት (በቆዳ ቆዳ ውስጥ) እና ኬራቲኖሳይት (በውጭኛው የቆዳ ሽፋን ውስጥ) በእንደዚህ አይነት ህክምናዎች ውስጥ ጥቅም ላይ ሊውሉ እንደሚችሉ እናበረታታለን፣ ምክንያቱም ሁለቱም አስፈላጊ በሚሆንበት ጊዜ ኮላጅን VII ለማምረት አስተዋጽኦ ሊያደርጉ ይችላሉ።

ይህ ፕሮጀክት ለአጠቃቀም ዝግጁ የሆነ ሕክምና እስካሁን ባያመጣም፣ ለወደፊት ሕክምናዎች ጠቃሚ መሠረት ጥሏል። ቁልፍ ተግዳሮቶችን እና ሊሆኑ የሚችሉ መፍትሄዎችን ለይተናል፣ እና አሁን ለRDEB ውጤታማ የሆኑ በጂን ላይ የተመሰረቱ ሕክምናዎችን ለማዘጋጀት የተሻለ ቦታ ላይ ነን።

ይህ ሥራ ከዴብራ ዩኬ ሕክምናዎችን ለማዘጋጀት እና በመጨረሻም ለኢቢ መድኃኒት ለማድረግ ካላት ተልዕኮ ጋር በጥብቅ የተጣጣመ ነው። ይህንን ጥናት ለመቀጠል እና ግኝቶቻችንን በዚህ አስከፊ ሁኔታ ለተጎዱ ታካሚዎች እና ቤተሰቦች እውነተኛ ጥቅሞች ለመተርጎም ቁርጠኛ ነን። (ከ2026 የመጨረሻ የእድገት ሪፖርት)